Antybiogram

Co to jest antybiogram?

Antybiogram to test mikrobiologiczny stosowany do badania wrażliwości drobnoustroju na jeden lub więcej leków przeciwdrobnoustrojowych.

Stosowany głównie na poziomie zdrowotnym, antybiogram jest tradycyjnie przeprowadzany na próbkach kolonii bakteryjnych pochodzących z jednostek pobranych przez wymaz z gardła, cewki moczowej, odbytnicy lub pochwy lub izolowanych z próbek kału, moczu lub plwociny.

Techniki wykonawcze a odporność na antybiotyki

Antybiogram jest często wykonywany metodą agarowo-dyfuzyjną, zwaną również techniką Kirby-Bauera.

W trakcie zabiegu pobierana jest próbka bakteryjna z kolonii i wysiewana (odpowiednio ułożona) na odpowiednie podłoże, w którym również rozprowadzane są krążki nasączone antybiotykami o znanych stężeniach (podyktowanych potrzebami terapeutycznymi), a następnie płytkę umieszcza się w inkubatorze a po określonym czasie (np. 18 godzin w temperaturze 35°C) można ocenić względnie równomierny wzrost drobnoustrojów, z mniej lub bardziej dużymi otoczkami wokół krążków bibuli. bakterii na każdy badany antybiotyk ocenia się: jeśli średnica jest duża, drobnoustrój jest wrażliwy na lek (S), jeśli jest mały, bakteria ma wrażliwość pośrednią (I lub MS), natomiast jeśli jest znikoma lub nawet nieobecny, badany gatunek bakterii jest oporny (R) na lek. W celu dokładnego określenia wrażliwości bakterii mierzy się średnicę stref zahamowania w mm, porównując uzyskane wartości z wartościami standardowymi dla szczepu bakteryjnego.

Jak zapobiegać oporności na antybiotyki?

Antybiotyki NIE są skuteczne przeciwko wirusom; typowe infekcje wirusowe to przeziębienie, grypa, zapalenie krtani, zapalenie oskrzeli, krup i większość bólu gardła (zapalenie gardła).
Stosowanie antybiotyków, gdy nie są one bezwzględnie konieczne i wskazane przez lekarza, może sprzyjać zjawisku antybiotykooporności (bakterie są „antybiotykooporne”, gdy nie mogą zostać zabite przez antybiotyk).
UWAGA: to bakteria jest odporna na antybiotyk, a NIE osoba. Dlatego nawet jeśli nigdy nie stosowałeś antybiotyków, możesz rozwinąć infekcje wywołane przez bakterie oporne na antybiotyki.
Aby zapobiec pojawieniu się oporności na antybiotyki, PODSTAWĄ jest ukończenie terapii przepisanej przez lekarza; nawet jeśli czujesz się dobrze, nie przerywaj przedwcześnie przyjmowania antybiotyków.

Gdy podczas antybiogramu aureole sąsiednich krążków łączą się ze sobą, rozpatrywane antybiotyki uważa się za synergistyczne.

Jako alternatywę dla opisanej właśnie metody, antybiogram można również wykonać na podłożu płynnym, oceniając – po inkubacji – zmętnienie odpowiadające różnym stopniom rozcieńczenia leku (patrz poniżej).

Antybiogram stał się obecnie niezbędnym badaniem, biorąc pod uwagę rozpowszechnione obecnie zjawisko lekooporności. Wybór niewłaściwego antybiotyku lub uciekanie się do leku o szerokim spektrum działania w celu uniknięcia tej procedury może w rzeczywistości wyselekcjonować szczepy bakteryjne odporne na działanie tego samego.W artykule poświęconym temu tematowi widzieliśmy, jak ta zdolność jest pierwotnie nabywana przez spontaniczne mutacje , a następnie przenoszone na inne bakterie. Nie jest więc przypadkiem, że odkrycie i kliniczne zastosowanie wielu antybiotyków szło w parze z pojawieniem się bakterii odpornych na ich działanie, co bardzo często jest winą niewłaściwego i przesadnego stosowania tych leków, np. w leczeniu infekcje wirusowe, przeciwko którym okazują się całkowicie bezużyteczne (jedynym możliwym uzasadnieniem jest zapobieganie nadkażeniom bakteryjnym u osób zagrożonych).

Dwa bardzo ważne parametry pochodzące z antybiogramu to MIC i MBC:

• MIC (minimalne stężenie hamujące): jest najniższym stężeniem badanego związku niezbędnym do zahamowania wzrostu danego mikroorganizmu.
• MBC (Minimum Bactericidal Concentration): to najniższe stężenie badanego związku wymagane do spowodowania śmierci ponad 99,9% danej populacji drobnoustrojów.

Aby ocenić MIC na podłożu stałym za pomocą antybiogramu, zakłada się, że czynnik drobnoustrojowy dyfunduje z krążka do agaru, tworząc gradient stężenia; w konsekwencji im dalej od krążka, tym niższe stężenie leku, które stopniowo spada aż do osiągnięcia krytycznego stężenia (minimalne stężenie hamujące w przybliżeniu MIC). Poza tym punktem występuje wzrost konfluentny, podczas gdy w obszarze najbliższym dysku nie ma wzrostu.

W antybiogramie na pożywce płynnej przygotowuje się serię probówek zawierających pożywkę hodowlaną i skalingowe rozcieńczenia (w stosunku 2) badanego antybiotyku. W każdej z tych probówek zaszczepia się standardową ilość badanych drobnoustrojów; następuje inkubacja i badanie tego samego. Zgodnie z przewidywaniami, w obecności zmętnienia widoczny jest wzrost bakterii, podczas gdy roztwór, który pozostaje klarowny, oznacza całkowite zahamowanie wzrostu drobnoustrojów, podkreślając optymalną skuteczność leku. W tym przypadku MIC (minimalne stężenie hamujące) reprezentuje najwyższe rozcieńczenie (tj. najniższe stężenie) antybiotyku zdolnego do całkowitego zahamowania wzrostu drobnoustroju. Zamiast tego ustala się MBC (minimalne stężenie bakteriobójcze) przez hodowanie próbek pobranych z pożywki płynnej na odpowiedniej pożywce stałej i ocenę wzrostu bakterii. MIC będzie zatem odpowiadać stężeniu antybiotyku obecnego w probówce, w którym lek jest najbardziej rozcieńczony i który w badaniu kulturowym nie wykazuje żadnych oznak aktywności bakterii (patrz rysunek).

Wyniki antybiogramu są publikowane w specjalnym raporcie, który wskazuje stosowane antybiotyki i odpowiednie MMC, czasami podaje się również kombinacje antybiotyków, które można zastosować i stopień oporności drobnoustrojów.
Tradycyjne metody wykonywania antybiogramu, które są bardzo przydatne w celach dydaktycznych, stale ewoluują. Obecnie, na przykład, dostępne są zautomatyzowane systemy komercyjne, podczas gdy bibuliczne krążki papierowe można zastąpić paskami zawierającymi przyrostowe dawki antybiotyku, odpowiednio wskazane na samym pasku (E-test na antybiogram).